胎牛血清使用中,您可能遇到的問題....... 如何儲存和解凍血清不會使血清品質(zhì)受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃使之融解,然后在室溫下使之全融。
但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。
長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。若存放于4℃時,請勿超過1個月。
若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響品質(zhì)。
如要除去沉淀,離心(400g,1-2分鐘)或讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一無菌瓶中(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。
所以,使用時搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1) 解凍血清時,請隨一邊解凍,一邊搖勻,使溫度及成分均一,減少沉淀產(chǎn)生。
(2) 血清分裝凍存時,規(guī)則搖均(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,易使蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且一邊熱滅火,一邊搖勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。
因為抗生素和血清中的一些成分在解凍后就開始降解。