蛋白酶是人類免疫缺陷病毒基因編碼中的一種特異天冬酰蛋白酶,其作用是將基因和基因表達所產(chǎn)生的蛋白裂解,成為具有活性的病毒結(jié)構(gòu)蛋白和酶。蛋白酶抑制劑從廣義上指與蛋白酶分子活性中心上的一些基團結(jié)合,使蛋白酶活力下降,甚至消失,但不使酶蛋白變性的物質(zhì)。
不同蛋白酶抑制劑的作用
PMSF
1)抑制絲氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巰基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于異丙醇中;
3)在室溫下可保存一年;
4)工作濃度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);
5)在水液體溶液中不穩(wěn)定,必須在每一分離和純化步驟中加入新鮮的PMSF。EDTA
1)抑制金屬蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃穩(wěn)定六個月以上;
4)工作濃度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);
5)加入NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值,否則EDTA不溶解。
胃蛋白酶抑制劑(pepstantin)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管緊張肽酶,組織蛋白酶D和凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}儲存液在4℃一周內(nèi)穩(wěn)定,-20℃穩(wěn)定6個月;
4)1作濃度:0.7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。
亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制絲氨酸和巰基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血漿酶和組織蛋白酶B;
2)lOmg/ml溶于水;
3)儲存液4℃穩(wěn)定一周,-20℃穩(wěn)定6個月;
4)工作濃度0.5ug/ml。
胰蛋白酶抑制劑(aprotinin)
1)抑制絲氨酸蛋白酶,如血漿酶,血管舒緩素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}儲存液4℃穩(wěn)定一周,-20℃穩(wěn)定6個月;
4)工作濃度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);
5)避免反復(fù)凍融:
6)在pH>12.8時失活。